產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7173 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:沙門氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Salmonella spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
沙門氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
HT-29, 人細(xì)胞2-(N-啉)乙磺酸鈉鹽shēng huà shì jì容量:保存:-20℃175ug/支
人絨癌細(xì)胞;JEG-3 大鼠腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL3-務(wù)1晴 3-PqNTqNqnitnILq 4632-87-4
腦動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)離子交換劑Ⅲ離子交換劑Ⅲ100克AR,98.5%
CN2 Others Mouse 小鼠 Coactin 2 / CN2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) LuciferasefromBacteria熒光素酶(細(xì)菌)5克精制級,40u/mg
大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1997-2-92,4-二硝基本胺;1-基-2,4-二硝基本2,4-aniline;2,4-benzenaMine;2,4-pxenylaMine
人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪赤蘚紅;赤蘚紅B鈉鹽Erythrosin B salt質(zhì)量規(guī)格:BS
AKT1 Others Human 人 AKT1 / PKB / PKBα 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 達(dá)拉菲尼,達(dá)帕菲尼Dabrafenib,GSK2118436A質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAFV600特異性抑制劑
人角膜細(xì)胞RNAHK miRNA5 μg乙酰檸檬酸三丁酯Acetyl tributyl 質(zhì)量規(guī)格:>97%
7721細(xì)胞,7721細(xì)胞 人細(xì)胞(結(jié)轉(zhuǎn)移),NCI-H292細(xì)胞 人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪乙酰檸檬酸三乙酯Triethyl acetyl 質(zhì)量規(guī)格:>99%
敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1海藻酸Alginic acid質(zhì)量規(guī)格:CP
CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-pxenYLALANINEL-本美國藥典級白色粉末RTsigma
CM-M123小鼠角膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL酚AS-TR1酸鹽 Naphthol AS-TR phosphate 2616-72-0 50MG 通用試劑
TU212細(xì)胞,人細(xì)胞 人臍內(nèi)皮(具有T24細(xì)胞特性),ECV-304細(xì)胞 倉鼠卵巢細(xì)胞;Lec1龍膽紫 Gqnticn Violqt;C.I. 42555/42535 248-6-9
C4-2(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2GLUCOSE-TRIS-EDTASTERILEGTE緩沖液生物技術(shù)級500MLCOLD
MET Others Human 人 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (5-溴-2-脫氧尿苷)
沙門氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒CD40LG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)蒼耳亭(標(biāo)準(zhǔn)品) Xanthatin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞 (HREC)( 5×105 ) HBE, 正常人上皮細(xì)胞系 HumanPR171關(guān)鍵中間體I PR171 intermedaite I質(zhì)量規(guī)格:>97%
人成纖維細(xì)胞總RNAHMF NAL-甘-異白二肽,甘氨酰-L-異亮氨酸Benzyl bromide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) PR171關(guān)鍵中間體IIPR171 intermedaite II質(zhì)量規(guī)格:>97%
狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdomePR171關(guān)鍵中間體III(alphaS)-alpha-[(4-Morpholinylacetyl)amino]benzenebutanoyl-L-leucyl-L-phenylalanine質(zhì)量規(guī)格:>97%