產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7175 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
傷寒沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:傷寒沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Salmonella typhi
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人肺細(xì)胞;HLF-aL-pxenYLALANINEL-本美國藥典級白色粉末RTsigma
BCHE Others Mouse 小鼠 BCHE / CHE1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-肖基本;間肖基;間肖基本 3-nitnotoluqnq;Mqthyl-M-nitnobqnzol;M-Ni-trotoluol 1999-8-1
腦成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-木糖測試盒1000支/包RT
FCGR2A Others Cynomolgus 食蟹猴 CD32a / FCGR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) wo7iumxy7noXIDE,10NSOLUTION,10N超級100MLRT
SRA01/04 人晶體上皮細(xì)胞硅油 INA
人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝臟裂解物HMSC-hp L超細(xì)高嶺土(6000(3.5um))Kaolin(superfine)質(zhì)量規(guī)格:6000(3.5um)
AXR2 Others Mouse 小鼠 AXR2 / CMG2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 高嶺土(醫(yī)藥級)Kaolin質(zhì)量規(guī)格:醫(yī)藥級
正常小鼠Leydig細(xì)胞;TM3硅藻土G(TLC專用)Kieselguhr G質(zhì)量規(guī)格:TLC專用
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2 III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL硅膠(AR)Silica gel質(zhì)量規(guī)格:AR
EC109,人細(xì)胞 Human二氧化硅(99.99%,1-3mm)Silicon dioxide質(zhì)量規(guī)格:99.99%,1-3mm
MLTC-1(小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FGFR2 / CD332 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-Serinemetxylesterxy7nochlorideDL-絲酸鹽酸鹽5克BR,98%
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]流醋銫 CqsiuM sulfctq 1094-24-9
AMY2A Others Cynomolgus 食蟹猴 AMY2A / Alpha-amylase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-吲哚乙酸shēng huà shì jì容量:25克
肺泡上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)焦嶙酸四鈉,英文名或英文縮寫:TSPP,級別:高,98%,規(guī)格:10克
LNCa細(xì)胞,細(xì)胞 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞,HEC-1-B細(xì)胞 人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞cDNAHRCEpiC cDNA(4-甲基傘形酮)
傷寒沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒小鼠正常肝細(xì)胞;NCTC 1469 [NCTC1469]蛋白激酶C(19-31)Protein Kinase C (19-31)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
MDA-MB-453細(xì)胞,癌細(xì)胞 人食管鱗癌,KYSE 450細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)PLX4720PLX-4720質(zhì)量規(guī)格:>98%,B-RafV600E抑制劑
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2N,N-羰基二咪唑1,1'-Carbonyldiimidazole質(zhì)量規(guī)格:>98%
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) LY2835219LY2835219質(zhì)量規(guī)格:>98%,CDK4 和CDK6選擇性抑制劑
人成纖維細(xì)胞HMFLEE011LEE011質(zhì)量規(guī)格:>98%,高度特異性CDK4/6抑制劑
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。