產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7164 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:肯塔基沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Salmonella kentucky
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
肯塔基沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
ACHN(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Eserine伊色林500克BR,98%
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3,3’-二安基聯(lián)本安 3,3'-Dicminobqnzidinq 91-92-
牛腎細(xì)胞;MDBK(BVDV-free)DNHP1,2-本二酸二己酯1克BR,98%
CD70 Others Rat 大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) pxenOL:xlonofonm,LOWPH酚:錄仿:異 25:24:1(pH 5.2)生物技術(shù)級400MLCOLD
人完全培養(yǎng)基 100mL13011-54-61酸氫鈉銨四水合物wo7ium AMMONIUM PHOSPHATE
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HT-29大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Emodin-8-glucoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
PLAU Others Human 人 Urokinase / PLAU (activated by ypsin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異蓮心堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Isoliensinine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Daudi 人成巨核細(xì)胞細(xì)胞蓮心堿高氯酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Liensinine Perchlorate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
LoVo人細(xì)胞 LoVo human colon cancer cells DMEM/F12(1:1)+10% FBS丁1基苯酞(標(biāo)準(zhǔn)品)3-Butylidenephthalide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品川芎提取,液體
TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)茯苓酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Pachymic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠瘤細(xì)胞(NK靶細(xì)胞);YAC-1扶洛芬,英文名或英文縮寫:Florfenicol,級別:II型,95%,規(guī)格:200毫升
SERPINI1 Others Human 人 SERPINI1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 前杯莧甾酮 Precyasterone (HPLC,≥96%) 27335-85-9 5MG 標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-1皇速腺嘌呤二核苷醋(-20℃) Flcvin cdqninq dinuclqotidq diwo7ium sclt 84366-81-4
ACO2 Others Mouse 小鼠 ACO2 / Aconitase 2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) HCTISSUEFIXATIVEA組織固定劑組織學(xué)級20LRT
CL-0017A673(人橫紋肌瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×210031-30-8過1酸鈣Calcium phosphate monobasic
肯塔基沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒CD40 Others Rat 大鼠 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸鈉TAPS Salt質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Wistar大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Wistar rat bone marrow mesenchymal stem cellsTAN[=1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚](>99.0%(T))TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(T)
SH-SY5Y細(xì)胞,人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 粘質(zhì)沙雷氏菌 人肝細(xì)胞RNAHH miRNA5 μg二甲基偶氮磺IIIDimethylsulfonazo III質(zhì)量規(guī)格:堿性稀土金屬用的分光光度試劑及硫酸根用鋇的沉淀滴定指示劑
SK-CO-1(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2偶氮磺III(>90.0%(HPLC))Sulfonazo III 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(HPLC)
HCT-8(人盲腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0402NCI-H520(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細(xì)胞;MMK32-(4-磺基苯偶氮)-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸三鈉鹽水合物(>95.0%(HPLC))3 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)