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實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2-(7-Methoxy-1-naphthyl)ethylamine   中文名：  分子式：C13H16ClNO  度：98.0%

兔子中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2-(5-Chloro-2-phenoxyphenyl)acetic acid  70958-20-2  中文名：  分子式：C14H11ClO3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶elisa試劑盒   兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶試劑盒、兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Acid Black 1  1064-48-8  中文名：酸性黑 1  分子式：C22H14N6Na2O9S2 

兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Adynerigenin β-neritrioside  88721-09-9  中文名：  分子式：C42H64O17  度：95.0%  關(guān)鍵詞：  強(qiáng)心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              4-Amino-N-methylbenzamide  中文名：4-氨基-N-甲基苯甲酰胺  分子式：C8H10N2O
羊膜細(xì)胞;HA利莫那班羧酸質(zhì)量規(guī)格：>98%Rimonabant carboxylic acid

SW-13細(xì)胞，腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 豬細(xì)胞系(ST),ST細(xì)胞 CL-0422RBL-1(大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2玉米黃質(zhì)質(zhì)量規(guī)格：>40%Zeaxanthin

D283 Med(腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2去氧膽酸質(zhì)量規(guī)格：>95.0%Deoxycholic acid

hMo-PB-c single donor 類外周血細(xì)胞來源的單核細(xì)胞， 10 million *成纖維細(xì)胞-心室HCF-avβ-環(huán)糊精質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,藥用級(jí)β-Cyclodextrin

HNE2, 細(xì)胞系雷米普利質(zhì)量規(guī)格：>98.0,BRRamipril
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴細(xì)胞;B95-8格列齊特Gliclazide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠瘤株;H22 小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL格列齊特（標(biāo)準(zhǔn)品）Gliclazide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠*間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) Mouse格列本脲Glyburide/Gliebenclamide質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

BMPR1A Others Human  BMPRIA / ALK-3 / CD292 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 格列本脲（標(biāo)準(zhǔn)品）Glyburide/Gliebenclamide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]格列美脲(標(biāo)準(zhǔn)品)Glimepiride質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
2-Amino-N-(2-chloro-6-methylphenyl) thiazole-5-carboxamide  中文名：  分子式：C11H10ClN3OS  度：98.0%  小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Dabigatran etexilate  中文名：  分子式：C34H41N7O5  度：98.0%  小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Ethyl 3-(3-amino-4-(methylamino)-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate  中文名：  分子式：C18H22N4O3  度：98.0%  小鼠交聯(lián)物(PY)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

N-(4-Cyanophenyl)glycine  中文名：  分子式：C9H8N2O2  度：98.0%  小鼠骨橋素(OPN)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

擬態(tài)弧菌PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）Methyl 1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-2-ethoxy-1H-benzimidazole-7-carboxylate  中文名：  分子式：C25H21N3O3  度：98.0%  小鼠Ⅰ型膠原C端肽elisa試劑盒   小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原C端肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。