產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63696 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
牛病毒1型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63696 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Ciprofloxacin 93107-08-5 中文名:鹽酸環(huán)丙沙星 分子式:C17H19ClFN3O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T Dihydroisotanshinone I 20958-18-3 中文名: 分子式:C18H14O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: ; *; 丹參; 紅根草; 二萜醌; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠超敏C反應(yīng)蛋白 英文名稱: Mouse C Reactive Protein HS 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CRP-hs Mannioside A 中文名: 分子式:C39H62O13
小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Ciprofloxacin 93107-08-5 中文名:鹽酸環(huán)丙沙星 分子式:C17H19ClFN3O3
小鼠叉頭框蛋白O3 英文名稱:
Mouse Forkhead Box protein O3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FOXO3
N-Benzoyl-L-glutamic acid
6094-36-6 中文名:N-苯甲酰-L-谷氨酸 分子式:C12H13NO5
FCGR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD16 / FCGR3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 維A酸;(標(biāo)準(zhǔn)品)All-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
LX-2 肝星形細(xì)胞比卡魯胺Bicalutamide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P16-姜1酚(標(biāo)準(zhǔn)品)6-Shogaol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
HCT116, 結(jié)細(xì)胞絞股藍(lán)皂苷XLIX(標(biāo)準(zhǔn)品)Gypenoside XLIX質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFa 大鼠肝實質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLYM-201636YM201636質(zhì)量規(guī)格:>98%,PIKfyve抑制劑
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 天麻素Gastrodin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR
J82 膀胱移行細(xì)胞癌甜菊苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Stevioside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
NCI-H716 [H716]結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 NCI-H716 [H716] human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS土貝母苷甲(標(biāo)準(zhǔn)品)Tubeimoside I質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
VEGFA Protein Human 重組 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白土荊皮乙酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Pseudolaric Acid B質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠中腦縫神經(jīng)細(xì)胞(腦脊)(MN-r)(1×106) HT-29, 細(xì)胞 Human土木香內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Alantolactone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2-Amino-9H-fluoren-9-one 3096-57-9
中文名:2-氨基-9H-芴-9-酮 分子式:C13H9NO 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Amino-6-methylbenzothiazole 2536-91-6 中文名:2-氨基-6-甲基苯并噻唑 分子式:C8H8N2S 度:98.0% 小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Amino-6-ethoxybenzothiazole 94-45-1 中文名:2-氨基-6-乙氧基苯并噻唑 分子式:C9H10N2OS 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠黃體生成素(LH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Amino-6-chloropurine 10310-21-1 中文名:2-氨基-6-氯嘌呤 分子式:C5H4ClN5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛病毒1型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)2-Amino-6-chlorobenzothiazole 95-24-9 中文名:2-氨基-6-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。