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實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子(mouse b-FGF/FGF-2) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 Lafutidine 中文名：拉呋替丁 分子式：C22H29N3O4S

小鼠堿性0酸酶elisa試劑盒 小鼠堿性0酸酶試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠堿性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠堿性0酸酶試劑盒、小鼠堿性0酸酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Ergosterol peroxide  2061-64-5 中文名：過(guò)氧化麥角甾醇 分子式：C28H44O3 度：96.0% 關(guān)鍵詞： ; *; 抗結(jié)核分枝桿菌; 菠蘿; 寬葉香蒲; 麥角甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Dregeoside A11 中文名： 分子式：C55H88O22 度：%

小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Dehydroadynerigenin β-neritrioside  143212-60-6 中文名： 分子式：C42H62O17

小鼠堿性0酸酶 英文名稱(chēng)： Mouse Alkaline phosphatase 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： ALP  D-Pinitol 中文名：D-松醇 分子式：C7H14O6 度：98.0%
尿道上皮細(xì)胞裂解物HUCLSphingomyelin鞘嶙酯100克BR，98%

長(zhǎng)白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞;201184 *癌細(xì)胞，CFPAC-1細(xì)胞 Ranca細(xì)胞，小鼠細(xì)胞羅格列酮 Rosiglitazone (HPLC,≥98%) 122320-73-4 20MG 通用試劑

SV40T轉(zhuǎn)化的胚腎細(xì)胞;293T吉拉爾特試劑T;錄化三基銨酰;酰三基錄化銨 Gircrd's rqcgqnt T;2-Hydrczino-N,N,N-triMqthyl-2-oxoqthcncMiniuM chloridq;(CcrboxyMqthyl)triMqthylcMMoniuM chloridq hydrczidq;Bqtcinq hydrczidq xy7nochloridq;TriMqthylccqthydrczidq cMMoniuM chloridq;TriMqthylcMinoccqtohydrczidq 13-46-6

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-(2-乙基)吲哚，英文名或英文縮寫(xiě)：Tryptamine，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：10克

CL-0144LoVo(細(xì)胞)5×106cells/瓶×2改良馬丁培養(yǎng)基Martin Broth,Modifie
NRK-52E，大鼠腎細(xì)胞丁香酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Syringic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KM932 臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL東莨菪苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Scopolin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞RNAHCPEC miRNA5 μg東莨菪內(nèi)酯Scopoletin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

IL23 Others Marmoset 狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 冬凌草甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)Oridonin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)豆腐果苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Helicid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
Cholesterol  57-88-5  中文名：膽固醇 分子式：C27H46O 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Chlorpheniramine maleate  113-92-8  中文名：馬來(lái)酸氯苯那敏 分子式：C20H23ClN2O4 度：98.0% 小鼠β基己糖苷酶A(β-HexA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Chlorotetracycline  57-62-5  中文名：金霉素 分子式：C22H23ClN2O8 度：98.0% 小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Chlorogenic acid  327-97-9  中文名：綠原酸 分子式：C16H18O9 度：98.0% 關(guān)鍵詞： *; 抗氧化; 莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

腸道病毒EV71、CA6、CA10、CA16及通用型PCR檢測(cè)試劑盒hlorhexidine acetate  56-95-1  中文名：醋酸氯己定 分子式：C26H38Cl2N10O4 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。