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實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠結(jié)締組織生長因子   英文名稱：   Mouse Connective Tissue Growth Factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CTGF  Cialis  171596-29-5  中文名：西力士  分子式：C22H19N3O4 

小鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Dronedarone   141625-93-6  中文名：鹽酸決奈達(dá)隆  分子式：C31H45ClN2O5S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠抗原(CCA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Dronedarone   141625-93-6  中文名：鹽酸決奈達(dá)隆  分子式：C31H45ClN2O5S  

小鼠角化細(xì)胞生長因子（KGF）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Drevogenin A  中文名：  分子式：C28H42O7  度：%

小鼠角化細(xì)胞因子elisa試劑盒   小鼠角化細(xì)胞因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠角化細(xì)胞因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠角化細(xì)胞因子試劑盒、小鼠角化細(xì)胞因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  D-Tryptophan methyl ester   中文名：  分子式：C12H15ClN2O2
CL-0241VCaP(細(xì)胞)5×106cells/瓶×2草酸鋰(>98%,BR)Lithium oxalate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

HUVEC-12, 臍內(nèi)皮細(xì)胞系 昆蟲卵巢細(xì)胞，SF9細(xì)胞 NK-92(惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞)硬脂酸鋰(>98%,BR)Lithium stearate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-303,5-二-L-酪氨酸3,5-Diiodo-L-tyrosine dihydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CHIT1 Others Human  CHIT1 / Chitinase-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氟氯西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Flucloxacillin 質(zhì)量規(guī)格：含量測定，標(biāo)準(zhǔn)品

恒河猴腎細(xì)胞;MMK2巴利森苷A；派立辛Parishin A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
OP9 小鼠*基質(zhì)細(xì)胞曲昔匹特（標(biāo)準(zhǔn)品）Troxipide質(zhì)量規(guī)格：含量測定

豬腎細(xì)胞;PK-15香蜂草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Isosakuranetin 7-O-rutinoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

BPH-1, 細(xì)胞鹽酸萘替芬（標(biāo)準(zhǔn)品）Naftifine 質(zhì)量規(guī)格：含量測定

結(jié)細(xì)胞;T84 大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL碳酸鈣（標(biāo)準(zhǔn)品）Calcium carbonate質(zhì)量規(guī)格：含量測定

神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)甲磺酸氨氯地平（標(biāo)準(zhǔn)品）Amlodipine mesylate質(zhì)量規(guī)格：含量測定
Cryptanoside A  98570-81-1  中文名：  分子式：C30H42O10  度：98.5%  關(guān)鍵詞：  古鉤藤; 強心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠破骨細(xì)胞分化因子elisa試劑盒   小鼠破骨細(xì)胞分化因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠破骨細(xì)胞分化因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠破骨細(xì)胞分化因子試劑盒、小鼠破骨細(xì)胞分化因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

Creoside III  1038602-12-8  中文名：  分子式：C18H24O9  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠素F(PGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Crenulatin  63026-02-8  中文名：大花紅天素  分子式：C11H20O6  度：98.5%  關(guān)鍵詞：  ; ; 阿魏; 半萜類; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠素E2(PGE2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Coumarin 7  27425-55-4  中文名： 7  分子式：C20H19N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠素E1(PGE1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

雞馬立克病毒(MDV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)Coumarin 6  38215-36-0  中文名： 6  分子式：C20H18N2O2S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠遷移率族蛋白B1（HMGB-1）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。