小鼠胚胎干細胞系MESPU30 elisa試劑盒技術原理:
1、抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2、結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
3、 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
4、 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。
5、此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
6、加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
試劑盒小貼士
1. 在收到試劑盒后,為保證檢測效果,需要根據(jù)說明書中保存條件正確儲存。除非特別注明,試劑盒大多是在2~8°C條件下儲存
2. 在實驗進行前,請確認包裝中的試劑盒成分與說明書一致,再進行后續(xù)操作
3. 溶解標準品過程中,注意標準品是否受潮,過程中要避免產(chǎn)生泡沫
4. 為了避免交叉污染,配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需要換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽
5. 每次孵育時,正確使用封板膠紙可保證結(jié)果的準確性
6. 正確洗板有助于實驗結(jié)果的穩(wěn)定性
7. TMB顯色底物在上板前應為無色,請避光保存。加入孔板后,將由無色變成不同程度的藍色
8. 終止液上板順序需與底物上板順序一致,加入終止液,溶液顏色由藍色變?yōu)?。如果出現(xiàn)綠色,即表明終止液與底物未混勻,請充分混合