人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中ELISA陰性對(duì)照的目的:
陰性對(duì)照的目的是排除假陽(yáng)性,陰性對(duì)照就是一個(gè)確定肯定已知是陰性的東西,如果結(jié)果出來這個(gè)樣本顯示陽(yáng)性了,那你ELISA就做出問題了。其他未知樣本,數(shù)值同它一樣或者更低的,全部認(rèn)為是陰性結(jié)果。
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入第一抗體工作液 100ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 60 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液 100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 30 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液 100ul ,置 37 ℃ 暗處反應(yīng) 15 分鐘。
每孔加入 100ul 終止液混勻。
9. 30 分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0nm 處測(cè) 吸光值。