小鼠促性腺激素釋放激素ELISA試劑盒測(cè)定結(jié)果判定
結(jié)果判定一般是根據(jù)比色結(jié)果和肉眼觀察綜合判定。如在判定過(guò)程發(fā)現(xiàn)有些反應(yīng)孔出現(xiàn)倒陰不陽(yáng)的現(xiàn)象或出現(xiàn)不常見(jiàn)的模式(如乙肝兩對(duì)半中出現(xiàn)12陽(yáng)性等),需本著嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度,重新復(fù)查。
對(duì)ELISA測(cè)定中出現(xiàn)問(wèn)題的可能原因(非試劑盒本身的原因),總結(jié)如下: 1)弱陽(yáng)性質(zhì)控樣本檢測(cè)不出溫育的時(shí)間或溫度不夠;顯色反應(yīng)時(shí)間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問(wèn)題。
2)測(cè)定的重復(fù)性差 ,這是由于測(cè)定操作引起的問(wèn)題,包括 ①加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不一致 ②加樣過(guò)快,孔間發(fā)生污染 ③加錯(cuò)樣本 ④加樣本及試劑時(shí),加在孔壁 ⑤不同批號(hào)試劑盒中組分混用 ⑥溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致 ⑦孔內(nèi)污染雜物,血清標(biāo)本未完全凝固即加入,反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細(xì)胞,易出現(xiàn)假陽(yáng)性等。 3)全部孔都不顯色 ① 漏加酶結(jié)合物; ② 洗板液配制中出現(xiàn)問(wèn)題 ③ 漏加顯色劑A或B ④ 終止劑當(dāng)顯色劑使用 4)全部板孔均有顯色 ① 板不干凈 ② 顯色液變質(zhì) ③ 洗板液受酶等污染